طرق تعريف وتقييم فعالية البروبيوتيك- مدونة غذائيات

Methods for identifying and evaluating the effectiveness of probiotics-Ghithaiyate-blog

1. مقدمة:

    في تدوينات سابقة تعرفنا  على البريبايوتيك  و خصائصه ومعاييره  وأسس تصنيفه وعلى آليات عمله  وعلى مخلفات تصنيعه وقياسات تأثيره  وعلى ماهية البروبيوتيك  وكيفية عمله  ومن يحتاجه؟  وعلى أنواع سلالات البروبيوتيك و على مصادر  عزلها و  متطلبات اختيارها وعلى الهيئات الرقابية لسلامة البروبيوتيك وما الفرق بين أطعمة البريبايوتيك البروبيوتيك؟  ومالفرق بين البريبايوتيك والألياف ؟ .كما تعرفنا على فوائد الأغذية المخمرة  وعلى الكيفير وعلى تركيبه الميكروبي والتغذوي و على تحضيره منزليا وتجاريا  وفوائده الصحية والتغذوية والتجميلية  وعلى سلالات البروبيوتيك المستخدمة في علاج الأمراض الأيضية والقلب والعصبية والنفسية و  الأمراض التنفسية والفيروسية وأمراض القلب والأوعية.وفي هذه التدوينة سنتعرف على طرق تعريف وتقييم فعالية البروبيوتيك

 2. طرق تعريف وتقييم فعالية البروبيوتيك

1.2. طرق تعريف البروبيوتيك

تسمح طرق العزل الكلاسيكية والتنميط الجيني الإضافي لـ PCR (Rep-PCR، RAPD) بتحديد السلالة والتجميع واختيار المرشحين التمثيليين لمزيد من اختبارات الفحص في المختبر وفي الجسم الحي. فيا توفر الميتاجينوميات معلومات عن الوفرة النسبية للكائنات الحية الدقيقة بعد التسلسل الهائل للحمض النووي ، أو شظايا الحمض النووي الريبي (RNA) من العينة بالإضافة إلى تحليل المعلوماتية الحيوية. وأخيرًا، يهدف علم الأيض إلى تحديد وقياس وتوصيف مستقلبات الجزيئات الصغيرة التي تنتجها الكائنات الحية الدقيقة من المصفوفات المعقدة. هناك حاجة إلى نوعين من الأدوات لتحليل المستقلبات: الرنين المغناطيسي النووي وقياس الطيف الكتلي

2.2. طرق تقييم فعالية البروبيوتيك

يمكن فحص سلالات البروبيوتيك المرشحة بطرق مختلفة، على سبيل المثال:

 (1) يمكن فحص الخصائص المناعية عن طريق القياس الكمي للسيتوكينات الرئيسية من خلال الحضن المشترك في نماذج خلوية مختلفة؛ ويمكن تحديد الحضن المشترك الطافي عن طريق (1 أ) مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)؛ يمكن تحديد العشائرالفرعية للخلايا (التنشيط والتمايز) عن طريق قياس التدفق الخلوي (1 ب)؛

(2) يمكن فحص سلالات الكائنات الحية المجهرية المرشحة من خلال قدرتها على تعزيز الحاجز المعوي، وعن طريق قياس قيم المقاومة الكهربائية عبر الظهارية شبه الخلوية لخطوط خلايا القولون البشرية؛

 (3) يمكن فحص سلالات الكائنات الحية المجهرية المرشحة عن طريق تحديد الجزيئات المحتملة المشتقة من البكتيريا ذات خصائص البروبيوتيك؛

 (4) يمكن فحص السلالات المرشحة للبروبيوتيك من خلال خصائصها المضادة للأكسدة من الخلايا البكتيرية السليمة عن طريق الاختبار الكيميائي أو باستخدام النماذج الخلوية؛

 (5) وأخيرا، يمكن دراسة جميع خصائص الكائنات الحية المجهرية المذكورة هنا عن طريق التعبير الجيني باستخدام ال PCR الكمي، مباشرة من خلايا البكتيريا و/أو خطوط الخلايا بعد التفاعل مع السلالات.

 PBMC — خلايا الدم وحيدة النواة المحيطية البشرية؛ BMDCs — الخلايا الجذعية المشتقة من نخاع العظم؛ MLN - العقد الليمفاوية المساريقية. البلاعم M1 — البلاعم المنشطة بشكل كلاسيكي؛ M2 — البلاعم المنشط بدلا من ذلك؛ TEER - المقاومة الكهربائية عبر الظهارية. SCFAs – الأحماض الدهنية قصيرة السلسلة؛ BSH - هيدرولاز الملح الصفراوي. AhR - ليجان مستقبلات الهيدروكربون أريل؛ FAE - استريز حمض الفيروليك؛ ROS – أنواع الأكسجين التفاعلية؛ ABAP — 2,2'-أزوبيس (2-ميثيل بروبيوناميدين) ثنائي هيدروكلوريد؛ CAT — الكاتلاز؛ SOD - ديسموتاز الفائق أكسيد. GPx - بيروكسيداز الجلوتاثيون؛ DCFH-DA—2′,7′-ثنائي أسيتات ثنائي كلوروفلوريسئين